Nitrocellulosamembran är en populär matris som används vid proteinblotting på grund av deras höga proteinbindande affinitet, kompatibilitet med en mängd olika detektionsmetoder (kemiluminescens, kromogen och fluorescens), och förmågan att immobilisera proteiner, glykoproteiner eller nukleinsyror.
Varför använder vi nitrocellulosa?
Ett objektglas av nitrocellulosa, nitrocellulosamembran eller nitrocellulosapapper är ett klibbigt membran som används för att immobilisera nukleinsyror i southern blots och northern blots Det används också för immobilisering av proteiner i western blottar och atomkraftsmikroskopi för dess ospecifika affinitet för aminosyror.
Varför används PVDF i Western blotting?
Western blotting med polyvinylidendifluorid (PVDF)-membran är en av de mest populära teknikerna för detektion och karakterisering av proteiner. Om denna teknik kombineras med immunodetektion kan beteendet hos ett visst protein klargöras.
Är nitrocellulosamembran hydrofobt?
Till skillnad från polyakrylamid ger nitrocellulosa ett lämpligt stöd för efterföljande proteinfärgning eller immunkemisk karakterisering. Bindning till nitrocellulosa förmedlas huvudsakligen av hydrofob interaktion (Schneider, 1980), även om elektrostatiska krafter också kan vara inblandade (Farrah et al., 1981.
Vilket är bättre nitrocellulosa eller PVDF?
Medan nitrocellulosa är skör och ömtålig, är PVDF mer hållbar och har högre kemisk resistens vilket gör den idealisk för reprobing och sekvensering. Nitrocellulosa kan visa sig vara svårt att strippa och testa om utan att tappa signalen.
