Vortexing kommer inte att klippa ditt RNA för att göra det oanvändbart om du gör slumpmässig priming RT - bara om du vill klona långt mRNA. Invitrogens tekniska support är också korrekt. Kloroform är tyngre än Trizol och kommer att sjunka till botten av röret.
Är det säkert att vortexa RNA?
Virtexa inte trizollysat eller RNA-prover för att undvika klippning. Efter extraktion, förvara RNA-prover på is hela tiden. Detta protokoll är utformat för prover lyserade 1mL Trizol i ett 1,5 eller 2mL rör.
Kan du värma RNA?
Undvik därför höga temperaturer ( över +65°C) eftersom dessa påverkar RNA:ts integritet. Istället, för att smälta ut sekundära strukturer, värm RNA till +65°C i 15 minuter i närvaro av denaturerande buffertar.
Hur resuspenderar man RNA-pellets?
återsuspendera din pellet med varmt vatten (40-50 grader Celsius). inkubera i 45 grader Celsius i 10 minuter. lägg dem i +4 i 4-6 timmar.
Hur fäller man ut RNA?
A.
Efter att s altkoncentrationen har justerats kan RNA fällas ut genom att tillsätta 2,5 volymer etanol eller 1 volym isopropanol och blanda noggrant, följt av kylning i minst 15 minuter vid -20°C.
