Logo sv.boatexistence.com

Hur gör man immunfluorescens?

Innehållsförteckning:

Hur gör man immunfluorescens?
Hur gör man immunfluorescens?

Video: Hur gör man immunfluorescens?

Video: Hur gör man immunfluorescens?
Video: Rag'n'Bone Man - Human (Official Video) 2024, Maj
Anonim

Följande är en översikt över de olika stegen i ett protokoll för indirekt immunfluorescensfärgning

  1. Experimentplanering och provförberedelse. …
  2. Sample Fixation. …
  3. Cellpermeabilisering. …
  4. Blockering. …
  5. Primär antikroppsinkubation. …
  6. sekundär antikroppsinkubation. …
  7. Motfärgning och montering.

Hur utför du immunfluorescens?

Alla inkubationssteg sker i rumstemperatur

  1. Tvätta cellerna två gånger och använd en pincett för att försiktigt placera täckglaset med uppåtvända celler i den fuktade kammaren.
  2. Fixa med 4 % formaldehyd i 10 minuter och tvätta 3 ×.
  3. Permeabilisera med 0,1 % TX-100/PBS i 15–20 minuter och tvätta 3 ×.

Hur använder man immunfluorescens i en cell?

Immunofluorescensprotokoll för vidhäftande celler

  1. Frö 1–1,5 x104 celler per brunn i ett 4-kammarglas i 500 mL odlingsmedium. Inkubera vid 37°C vid 5 % CO2.
  2. 32–36 timmar efter cellsådd, ta bort cellodlingsmediet och skölj cellerna 3 gånger med 500 µL 1X PBS.

Vad är ett exempel på immunfluorescens?

En forskare kan till exempel skapa primära antikroppar i en get som känner igen flera antigener, och sedan använda färgämneskopplade sekundära kaninantikroppar som känner igen getantikroppens konstanta region (" kanin anti-get" antikroppar).

Vad är användningen av immunfluorescensfärgning?

Immunofluorescens (IF)-färgning är en allmänt använd teknik inom biologisk forskning och klinisk diagnostik IF använder fluorescensmärkta antikroppar för att detektera specifika målantigener. Följt av bildbehandling är det en väldigt direkt teknik eftersom du faktiskt kan se något.

Rekommenderad: