Amfolyter används för att bilda en pH-gradient i kapillären, och proteinerna som ska separeras migrerar (eller fokuseras) genom amfolytmediet tills de blir oladdade vid deras pI värden.
Varför används amfolyter i IEF?
I IEF färdas amfolyter enligt sin laddning under påverkan av ett elektriskt fält, i närvaro av en pH-gradient, tills molekylens nettoladdning är noll (t.ex. isoelektrisk punkt, pI). … Även de enklaste amfolyterna (t.ex. aminosyror) kan skapa en pH-gradient och fungera som en isoelektrisk buffert.
Varför är isoelektrisk punkt viktig?
Den isoelektriska punkten är signifikant vid proteinrening eftersom den representerar pH där lösligheten vanligtvis är minimal. … Denna polymer har unika egenskaper för att säkerställa att proteiner bildar en pH-gradient när du applicerar ett elektriskt fält över lösningen.
Hur skapar amfolyter pH-gradient?
I CIEF skapas en heterogen pH-gradient inuti kapillären genom att applicera spänning över bäraramfolyterna Bredden på pH-gradienten beror på vilken serie amfolyter som väljs. Amfolyter finns kommersiellt tillgängliga för att täcka både breda och smala pH-intervall, som visas i figur 5.2.
Vad är amfolyternas kemi?
Amfolyter är föreningar som när de löses upp i vatten (vilket i sig är en amfoter förening) kan verka antingen som syra eller som en bas.
