Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC)-analys är en metod som används för att direkt visualisera protein-protein-interaktion in vivo med hjälp av avbildning av levande celler eller fixerade celler. … BiFC beskrevs först av Hu et al.
Hur fungerar bimolekylär fluorescenskomplementering?
Arbetsprincipen för BiFC är baserad på utvecklingen av ett fluorescerande komplex, som ett resultat av associationen av två segment av ett fluorescerande protein när de är nära varandra på grund av protein–proteininteraktion i fragmenten, dvs., i BiFC är en fluorofor uppdelad i amino- och karboxyländar.
Vad är BiFC-test?
bimolekylär fluorescenskomplementeringsanalys (BiFC) möjliggör enkel och direkt visualisering av proteininteraktioner i levande celler (45). BiFC-metoden är baserad på bildandet av ett fluorescerande komplex när två proteiner fuserade till icke-fluorescerande fragment av ett fluorescerande protein interagerar med varandra (Fig.
Varför görs BiFC-testet?
Idén med BiFC är att uttrycka halvor av GFP sammansmält med dina intressanta proteiner Om POI:erna samverkar kan du sammanföra båda halvorna för att få en fungerande GFP. Så om det finns en halva av en GFP uttryckt i cellen är jag inte förvånad över att en GFP-antikropp kan upptäcka det.
Är BiFC reversibel?
Irreversibiliteten för BiFC-komplex har dokumenterats väl (10), och det verkar som om de flesta, om inte alla, fluorescerande protein- baserade BiFC-system är irreversibla (8, 33, 43, 48–51).
