Vad är det bästa sättet att separera kloroplasterna från bufferten?

2024 Författare: Fiona Howard | [email protected]. Senast ändrad: 2024-01-10 06:43

För att kunna extrahera pigmenten från Kloroplasterna suspenderas i en isoleringsbuffert. För att kunna extrahera pigmenten från kloroplasterna måste vi bli av med bufferten först. Vad är det bästa sättet att separera kloroplasterna från bufferten? använd en centrifug för att separera

Hur isolerar man en kloroplast?

I kloroplastisoleringsmetoden bryts cellväggen mekaniskt med hjälp av en mixer eller homogenisator. Sedan avlägsnas den obrutna bladvävnaden och cellavfallet genom filtrering. Kloroplasterna samlas upp genom centrifugering med en percoll-gradient.

Hur gör man en kloroplastisoleringsbuffert?

Förbered den erforderliga mängden 1X kloroplastisoleringsbuffert genom att späda 2X buffertlösningen 1:1 med dH2O-vatten Tillsätt 10 µL av 10 % BSA-lösningen per ml 1X kloroplast Isoleringsbuffert. Precis före användning, tillsätt 1 µL DTT per 1 mL kloroplastisoleringsbuffert. Märk denna buffert som "Complete Buffer ".

Vad finns i en kloroplastisoleringsbuffert?

DNA-isoleringsbuffert bestod av 100 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM EDTA och 1 mM DTT Kloroplastlysen erhölls genom att inkubera kloroplastpellet med 8 ml DNA-isoleringsbuffert, 1,5 ml 20 % SDS, 20 µl 2-merkaptoetanol och 30 µl Proteinas K (10 mg/ml) i ett centrifugrör vid 55°C i 4 timmar.

Vilket pH-värde har bufferten som används för att homogenisera spenatblad i kloroplastisoleringsprotokoll?

Spenat är laddad med bra kloroplaster och de isolerar lätt. Du måste lägga bladen i en kall mixer med 0,1 M fosfatbuffert, pH 7,5 och 0,5 M sackaros för att de inte ska spricka.